PCR采样注意事项
眼部
无菌棉拭子润湿后,翻开动物眼睑,用棉拭子轻轻滚动蘸取眼结膜表面细胞成分,并用棉拭子蘸取眼部分泌物,注意即使只有一个眼睛感染也需要采集两个眼睛的样本(可以先采集健康眼睛)。拭子采集完毕后浸泡在无菌生理盐水或者PBS溶液中,晃动数次后取出,采集下一个部位。
鼻部
使用上述同一棉拭子,轻轻插入动物的鼻孔内,停留数秒,轻轻转动棉拭子,采集粘膜表面细胞成分后取出,将拭子浸泡在无菌生理盐水或者PBS溶液中,晃动数次后取出,采集下一个部位。
咽部
使用上述同一棉拭子,采集口腔粘膜,必要时需要采集深咽部和扁桃体(该动作可能会导致动物的呕吐),棉拭子采集后浸泡在无菌生理盐水或者PBS溶液中,将EP管密封后送检。
注意:无菌生理盐水或者PBS溶液的体积应不少于0.5mL,且需防止液体过多稀释病毒浓度。采集后应尽快送检,运输中放入冰袋防止样本被降解,样本在路程中的时间不超过2天。
肛拭子采集
将无菌棉拭子前端用无菌生理盐水或PBS溶液润湿后,轻柔插入动物肛门,轻轻旋转,保证棉拭子上有足够量的样本后取出,放入含有无菌生理盐水或者PBS溶液(液体量不少于 0.5mL)的无菌EP管中密封保存,采集后应尽快送检,运输中放入冰袋防止样本被降解,样本在路程中的时间不超过2~3天。
血液样本采集
血液采集后,放入EDTA中密封保存,样本量应大于500 μL。采集后应尽快送检,运输中放入冰袋防止样本被降解,样本在路程中的时间不超过2~3天。
尿液采集
尿液抽取后,放入无菌的EP管中密封保存,样本量应大于1mL。采集后应尽快送检,运输中放入冰袋防止样本被降解,样本在路程中的时间不超过2~3天。
胸水/腹水采集
胸水/腹水抽取后,放入无菌的EP管中密封保存,样本量应大于500μL。需注意,如果胸腹水中有大量血液成分,请放入含有EDTA的抗凝管中寄送。采集后应尽快送检,运输中放入冰袋防止样本被降解,样本在路程中的时间不超过2~3天。